ΔΔCT法验证RNA-Seq结果,方便、快捷,特别适用于医学大样本基因表达量检测
制作标准品,考察引物扩增效率,制作标准曲线,获取样品内DNA绝对量
设计茎环引物,SYBR Green法/ Taqman探针法验证miRNA-Seq结果,精准、特异,特别适用于医学大样本miRNA表达量检测
实时荧光定量PCR(real-time flurescent quan-titive polymerase chain reaction,FQ-PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后对模板进行定量分析的方法。
实时荧光定量特点主要有以下几个方面:
过程可视性强,用产生荧光信号的多少来显示扩增产物的量,动态实时连续荧光监测,具有很好的可视性;
荧光信号通过荧光染料嵌入双链DNA,或双重标记的序列特异性荧光探针或能量信号转移探针等方法获得,大大地提高了检测的灵敏度、特异性和精确性;
结果重现性好,定量动态范围高达五个数量级。
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